1.一種在酵母宿主細胞中產生重組蛋白的方法，其中所述宿主酵母細胞缺乏二肽基氨肽酶（DAP）活性，所述方法包括：a.?用編碼蛋白的多核苷酸載體轉化其中DAP活性已經被去除的基因修飾的酵母細胞；b.?在誘導蛋白表達的條件下在培養基中培養被轉化的宿主細胞；和c.?從轉化的宿主細胞或培養基中分離蛋白。

2.權利要求1的方法，其中酵母細胞是巴斯德畢赤酵母（Pichia?pastoris）。

3.權利要求1或2的方法，其中通過從酵母細胞基因組中刪除或破壞STE?13和DAP2基因而去除DAP活性。

4.權利要求1的酵母，其中宿主細胞已經被基因工程化以產生包含人樣N-聚糖的糖蛋白。

5.權利要求4的酵母，其中人樣N-聚糖選自雜合和復合的N-聚糖。

6.權利要求1的酵母，其中宿主細胞被基因工程化以產生主要具有N-聚糖的糖蛋白，所述N-聚糖選自Man₅GlcNAc₂、GlcNAcMan₅GlcNAc₂、GalGlcNAcMan₅GlcNAc₂、NANAGalGlcNAcMan₅GlcNAc₂、GlcNAcMan₃GlcNAc₂、GlcNAc_（1-4）Man₃GlcNAc₂、Gal_(1-4）G1cNAc_（1-4）Man₃GlcNAc₂和?NANA_（1-4）Gal_（1-4）GlcNAc_（1-4）Man₃GlcNAc₂。

7.權利要求1的方法，其中酵母進一步表達人糖蛋白。

8.一種缺乏二肽基氨肽酶（DAP）活性的基因修飾的酵母細胞，包括其中編碼STE13和DAP2的基因組DNA已被從酵母細胞基因組中刪除或破壞的酵母細胞系。

9.權利要求8的酵母細胞，其中酵母細胞是巴斯德畢赤酵母。

10.權利要求6的方法，其中宿主細胞已被基因工程化以產生包含人樣N-聚糖的糖蛋白。

11.權利要求10的方法，其中人樣N-聚糖選自雜合和復合的N-聚糖。

12.權利要求6的方法，其中宿主細胞被基因工程化以產生主要具有N-聚糖的糖蛋白，所述N-聚糖選自Man₅GlcNAc₂、GlcNAcMan₅GlcNAc₂、GalGlcNAcMan₅GlcNAc₂、NANAGalGlcNAcMan₅GlcNAc₂、GlcNAcMan₃GlcNAc₂、GlcNAc_（1-4）Man₃GlcNAc₂、Gal_（1-4）GlcNAc_（1-4）Man₃GlcNAc₂和NANA_（1-4）Gal_（1-4）GlcNAc_（1-4）Man₃GlcNAc₂。

13.權利要求6的方法，其中所述蛋白是人糖蛋白。

14.一種在酵母細胞中產生具有N-末端識別位點Xaa-Pro或Xaa-Ala的治療性蛋白的方法，其中Xaa代表任何一種氨基酸，所述方法包括：a.?用編碼具有選自Xaa-Pro和Xaa-Ala的N-末端識別位點的治療性蛋白的多核苷酸載體轉化其中DAP活性已經被去除的基因修飾的酵母細胞；b.?在誘導治療性蛋白表達的條件下培養被轉化的宿主細胞；以及c.?從轉化的宿主細胞中分離治療性蛋白。