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[發(fā)明專(zhuān)利]制造人源化的非人類(lèi)哺乳動(dòng)物的方法無(wú)效

專(zhuān)利信息
申請(qǐng)?zhí)枺?/td> 201080038847.9 申請(qǐng)日: 2010-06-28
公開(kāi)(公告)號(hào): CN102725400A 公開(kāi)(公告)日: 2012-10-10
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 陳清風(fēng);陳建竹 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: 麻省理工學(xué)院
主分類(lèi)號(hào): C12N5/071 分類(lèi)號(hào): C12N5/071
代理公司: 北京市金杜律師事務(wù)所 11256 代理人: 陳文平
地址: 美國(guó)馬*** 國(guó)省代碼: 美國(guó);US
權(quán)利要求書(shū): 查看更多 說(shuō)明書(shū): 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 制造 人源化 人類(lèi) 哺乳動(dòng)物 方法
【權(quán)利要求書(shū)】:

1.一種在非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)重建功能性人類(lèi)血細(xì)胞譜系的方法,包括

a)將人類(lèi)造血干細(xì)胞(HSC)和編碼一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子的核酸引入到一種免疫缺陷型非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi);并且

b)在其中在該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)該核酸被表達(dá)并且這些人類(lèi)HSC分化成多種功能性人類(lèi)血細(xì)胞譜系的條件下維持該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物,

由此在該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)重建功能性人類(lèi)血細(xì)胞譜系。

2.如權(quán)利要求1所述的方法,其中在將HSC引入該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)之后引入編碼該一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子的核酸。

3.如權(quán)利要求1所述的方法,其中編碼該一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子的核酸以裸DNA的形式或在一種載體中引入。

4.如權(quán)利要求3所述的方法,其中該載體是一種質(zhì)粒、一種病毒載體、或它們的一種組合。

5.如權(quán)利要求4所述的方法,其中該病毒載體是一種慢病毒或一種腺病毒載體。

6.如權(quán)利要求1所述的方法,其中編碼該一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子的核酸以質(zhì)粒DNA的形式使用流體動(dòng)力學(xué)注射方法引入。

7.如權(quán)利要求1所述的方法,其中該一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子是選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:白細(xì)胞介素-12(IL-12)、白細(xì)胞介素-15(IL-15)、Flt3L(Fms-相關(guān)酪氨酸激酶3配體)、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、白細(xì)胞介素-4(IL-4)、白細(xì)胞介素-3(IL-3)、巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)、促紅細(xì)胞生成素(EPO)以及它們的一種組合。

8.如權(quán)利要求1所述的方法,其中該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物是一個(gè)小鼠。

9.如權(quán)利要求8所述的方法,其中該小鼠是選自下組,該組由以下各項(xiàng)組成:一種攜帶重度聯(lián)合免疫缺陷突變的非肥胖糖尿病小鼠(NOD/scid小鼠)、一種攜帶重度聯(lián)合免疫缺陷突變并且缺少針對(duì)細(xì)胞因子受體γ鏈的一種基因的非肥胖糖尿病小鼠(NOD/scid?IL2Rγ-/-小鼠)以及一種Balb/c?rag-/-?γc-/-小鼠。

10.如權(quán)利要求1所述的方法,其中被重建的該功能性人類(lèi)血細(xì)胞譜系是功能性人類(lèi)髓樣細(xì)胞、功能性人類(lèi)淋巴樣細(xì)胞或它們的組合。

11.如權(quán)利要求10所述的方法,其中這些人類(lèi)髓樣細(xì)胞是人類(lèi)單核細(xì)胞、人類(lèi)巨噬細(xì)胞、人類(lèi)樹(shù)突狀細(xì)胞、人類(lèi)紅細(xì)胞、以及它們的組合;并且該人類(lèi)淋巴樣細(xì)胞是人類(lèi)NK細(xì)胞、人類(lèi)B細(xì)胞、人類(lèi)T細(xì)胞、以及它們的組合。

12.如權(quán)利要求1所述的方法,其中該一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子是白細(xì)胞介素-15(IL-15)以及Fms-相關(guān)酪氨酸激酶3配體(Flt3L),并且在該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)重建的這些功能性血細(xì)胞譜系是人類(lèi)NK細(xì)胞。

13.如權(quán)利要求1所述的方法,其中該一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子是粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)以及白細(xì)胞介素4(IL-4),并且在該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)重建的這些功能性血細(xì)胞譜系是人類(lèi)樹(shù)突狀細(xì)胞。

14.如權(quán)利要求1所述的方法,其中該一種或多種細(xì)胞因子是巨噬細(xì)胞集落刺激因子(MCSF),并且在該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)重建的這些功能性血細(xì)胞譜系是人類(lèi)單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞。

15.如權(quán)利要求1所述的方法,其中該一種或多種細(xì)胞因子是促紅細(xì)胞生成素(EPO)以及白細(xì)胞介素3(IL-3),并且在該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)重建的這些功能性血細(xì)胞譜系是人類(lèi)紅細(xì)胞。

16.一種在非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)重建功能性人類(lèi)NK細(xì)胞的方法,包括

a)將人類(lèi)造血干細(xì)胞(HSC)和編碼一種或多種人類(lèi)細(xì)胞因子的核酸引入一種免疫缺陷型非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi),其中當(dāng)表達(dá)于該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)時(shí),這些人類(lèi)細(xì)胞因子促進(jìn)人類(lèi)HSC分化成功能性人類(lèi)NK細(xì)胞;并且

b)在其中在該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)該核酸被表達(dá)并且這些人類(lèi)HSC分化成多種功能性人類(lèi)NK細(xì)胞的條件下維持該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物,

由此增強(qiáng)了該非人類(lèi)哺乳動(dòng)物體內(nèi)人類(lèi)NK細(xì)胞的重建。

17.如權(quán)利要求16所述的方法,其中該核酸編碼人類(lèi)IL-15以及人類(lèi)Flt-3/Flk-2配體。

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