技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及小檗堿和阿霉素，具體涉及小檗堿和阿霉素混合制劑在制備抗阿霉素性心功能障礙或抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。?

背景技術(shù)

阿霉素是臨床上應(yīng)用十分廣泛的抗腫瘤藥物，它對(duì)于白血病、淋巴瘤、乳腺癌、肺癌等都有著非常顯著的療效，是目前臨床上最常用的抗腫瘤藥物之一。阿霉素主要的毒副作用為心肌毒性，它不僅可引起心律失常，且隨著劑量的累積，還能誘發(fā)進(jìn)行性心肌病、充血性心力衰竭。80年代以來，阿霉素心肌毒性分子機(jī)制的研究已取得了許多新的進(jìn)展，目前大多數(shù)的研究認(rèn)為可能和阿霉素可通過氧化應(yīng)激途徑，或非依賴于氧化應(yīng)激途徑，啟動(dòng)內(nèi)、外源性的凋亡信號(hào)通路，誘導(dǎo)心肌細(xì)胞死亡有關(guān)。因此出現(xiàn)一系列抗氧化劑、鐵離子螯合劑和自由基清除劑、鈣離子抑制劑、神經(jīng)酰胺抑制劑、凋亡一些相關(guān)基因的抑制劑等等。如：右丙亞胺、卡地洛爾、黃酮類、他汀類、維生素E等。但迄今為止，臨床研究發(fā)現(xiàn)，還沒有一種制劑能夠在不影響阿霉素抗腫瘤作用的前提下同時(shí)又可以顯著降低阿霉素心肌毒性反應(yīng)。因此，如何開發(fā)新的抗阿霉素心肌毒性的心臟保護(hù)藥物一直是醫(yī)學(xué)面臨的重要課題。?

近年來國(guó)內(nèi)不斷有文獻(xiàn)報(bào)道小檗堿對(duì)控制心力衰竭、心律失常、高血壓等危險(xiǎn)因素的患者有顯著療效且無明顯毒副作用。研究還發(fā)現(xiàn)小檗堿可明顯改善心力衰竭患者的心功能，增加運(yùn)動(dòng)耐量，它可能是通過正性肌力、降低外周阻力以及抑制炎性介質(zhì)的釋放等多個(gè)方面發(fā)揮其治療心衰的作用。在以往的實(shí)驗(yàn)中亦發(fā)現(xiàn)小檗堿能有效防治脂多糖性心功能障礙，其作用機(jī)制可能與其糾正心肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子穩(wěn)態(tài)異常，抑制心肌細(xì)胞釋放腫瘤壞死因子α有關(guān)。同時(shí)前期的實(shí)驗(yàn)表明小檗堿能減輕去甲腎上腺素引起的心肌細(xì)胞損傷，可能是通過阻斷ROS-TNF?α-Caspase信號(hào)通路抑制去甲腎上腺素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞凋亡。綜上所述，小檗堿與阿霉素混合制劑可作為腫瘤治療、防治阿霉素心肌毒性的新制劑。?

本發(fā)明發(fā)現(xiàn)小檗堿(berberine，Ber)與阿霉素(Doxorubicine，DOX)聯(lián)合?應(yīng)用時(shí)，能有效地防治阿霉素性心肌毒性，同時(shí)又不會(huì)影響甚至增加阿霉素的抗腫瘤療效。為臨床上治療阿霉素的心肌毒性提供新的措施，從而改善阿霉素化療后病人的生存質(zhì)量，使阿霉素能更好的廣泛應(yīng)用于抗腫瘤的臨床治療中。?

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供一種小檗堿和阿霉素混合制劑在制備抗阿霉素性心功能障礙或抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。?

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：小檗堿和阿霉素混合制劑在制備抗阿霉素性心功能障礙或抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，所述藥物中小檗堿和阿霉素的摩爾濃度比為(0.625～4)∶1，最佳比例為1∶1。?

所述藥物為口服制劑或注射制劑。?

通過體外原代培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞48小時(shí)后，分別設(shè)立對(duì)照組；DOX(1μmol/L)組；Ber(0.625μmol/L)+DOX組；Ber(0.25μmol/L)+DOX組；Ber(1.00μmol/L)+DOX組；Ber(4.00μmol/L)+DOX組；Ber(4.00μmol/L)單用組。藥物處理24小時(shí)后用CCK-8檢測(cè)各組細(xì)胞的活力。結(jié)果證明給予小檗堿和阿霉素混合制劑組的細(xì)胞存活率均高于阿霉素單用組，并顯現(xiàn)出一定的劑量依賴性。同時(shí)通過檢測(cè)細(xì)胞上清中乳酸脫氫酶(Lactate?dehydrogenase，LDH)含量發(fā)現(xiàn)小檗堿能顯著減輕阿霉素引起的心肌損傷。ELISA法檢測(cè)各組的組蛋白含量，進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)小檗堿和阿霉素混合制劑組的細(xì)胞凋亡率均較阿霉素單用組明顯降低。另一方面選用腫瘤細(xì)胞MCF-7細(xì)胞，培養(yǎng)24h后加藥處理24和48h后CCK-8檢測(cè)細(xì)胞活力，并計(jì)算細(xì)胞的抑制率，觀察小檗堿對(duì)阿霉素抗腫瘤作用的影響。結(jié)果顯示小檗堿和阿霉素混合制劑組對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制率高于阿霉素單用組。基于上述研究結(jié)果，小檗堿不僅可以減輕阿霉素引起的心肌損傷，還能對(duì)阿霉素引起的心肌凋亡起到抑制作用，同時(shí)又不會(huì)減弱、甚至增強(qiáng)阿霉素的抗腫瘤效用。?

附圖說明

圖1為各處理組細(xì)胞上清中LDH含量測(cè)定結(jié)果圖。n＝4.^#P＜0.05與對(duì)照組比較，^*P＜0.05與DOX(1μM)組比較。?

圖2為各處理組心肌細(xì)胞裂解液OD值測(cè)定結(jié)果圖。n＝4.^#P＜0.05與對(duì)照組比較，^*P＜0.05與DOX(1μM)組比較。?

圖3-1為不同劑量的小檗堿/阿霉素處理24h后對(duì)MCF-7細(xì)胞的抑制率結(jié)果?圖，n＝3。?