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[發明專利]檢測沙門氏菌血清型的復合基因芯片及其檢測方法無效

專利信息
申請號: 201010201331.3 申請日: 2010-06-13
公開(公告)號: CN101955993A 公開(公告)日: 2011-01-26
發明(設計)人: 馮家望;王小玉;胡松楠;成曉維;游淑珠;鄺筱珊;周新朋 申請(專利權)人: 中華人民共和國珠海出入境檢驗檢疫局
主分類號: C12Q1/68 分類號: C12Q1/68;C12Q1/10
代理公司: 廣東秉德律師事務所 44291 代理人: 楊煥軍;田學東
地址: 519015 廣*** 國省代碼: 廣東;44
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 檢測 沙門氏菌 血清 復合 基因芯片 及其 方法
【權利要求書】:

1.一種檢測沙門氏菌血清型的復合基因芯片,其特征在于,將用于檢測沙門氏菌血清型的靶基因viaB、tyv、fliC-α、fliC1、rfbJ、fliC2、invA、hilA的探針整合于同一張芯片上,其中各靶基因的探針序列分別為:

TTCAGAATTA?ACCGTAAGGA?TATAGTAAAG?ATGAAATATT;

AGTTTGTACA?TGGTGATATT?CGCAACAAAA?ATGATGTTAC;

ATACTGGTTC?AATTAAGGAT?GGTAAGGTTT?ACTATAACAG;

ACTCTCAGAC?CCTGGGTCTG?GATACGCTGA?ATGTGCAACA;

TTGCGTGAAA?TGTACAACAG?GCGAACAGAT?AAGAGACTTT;

TTACGCGACT?GTCAGTGGAT?ACGATGATGC?CGCAGATACA;

TGTCCTTTGG?TATTAATCCA?ACAATCCATC?AGCAAGGTAG;

GGCGATGAAT?TACGCTCACA?ACACCTGCAG?GATAATCCAA。

2.根據權利要求1所述基因芯片,其特征在于,所述芯片采用硅基生物傳感器芯片。

3.一種檢測沙門氏菌血清型的方法,其特征在于,包括以下步驟:

1)提取被檢測物質的染色體DNA;

2)使用生物標記素標記引物;

3)使用上述被標記的引物以聚合酶鏈反應方法來擴增所述染色體DNA中包含靶基因viaB或tyv或fliC-α或fliC1或rfbJ或liC2或invA或hilA的基因片段;

4)將上述擴增產物與權利要求1所述的復合基因芯片進行雜交;

5)檢測復合基因芯片的雜交信號。

4.根據權利要求3所述的方法,其特征在于,步驟2)中所述的引物為與靶基因viaB、tyv、fliC-α、fliC1、rfbJ、fliC2、invA、hilA分別相應的八種引物,其中八種引物序列分別為:

viaB引物序列:

正:GCGGCAACATCAGTCCAG,反:GCGGCTCACGTACTCCAAAT;

tyv引物序列:

正:GCTTCCTTGGGAGTAATCTTGCC,反:TGTAGTCATTGCCACTTGACCTG;

fliC-α引物序列:

正:CCTTCGGCTACATTAAGCACTAC,反:GACTGCACCATCATCAGCAACAT;

fliC1引物序列:

正:CTCAGTTCAACGGCGTGAAAGTC,

反:CAATCGTAGTATCGGCATATCCTGT;

rfbJ引物序列:

正:AGACACTTTGATGAAATTGGGCATT,

反:TCTTTCAAACTTACCCCAGCACC;

fliC2引物序列:

正:CGATACTGCTGTAGCTGCTTCCT,

反:GCGGCAACAGTGACTTCATAGGT;

invA引物序列:

正:CGTTGATATTACTTGTGCCGAAGA,

反:CGTTACCCAGAAATACTGACTGCTAC;

hilA引物序列:

正:AACTTACTTTCGCCCATTTCTGC,反:GTTATTTCCTGCGTGGATATTTCTT。

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