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[發(fā)明專利]禽流感病毒及用于檢測、預(yù)防禽流感病毒的試劑盒和疫苗無效

專利信息
申請?zhí)枺?/td> 201010192680.3 申請日: 2010-06-04
公開(公告)號: CN101899418A 公開(公告)日: 2010-12-01
發(fā)明(設(shè)計(jì))人: 劉佩紅;周錦萍;葛菲菲;劉健;張維誼;鞠厚斌;李凱航 申請(專利權(quán))人: 上海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心
主分類號: C12N7/00 分類號: C12N7/00;C12Q1/70;C12Q1/68;C07K16/10;A61K39/145;A61P31/16;C12R1/93
代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001 代理人: 林煒
地址: 201103 上*** 國省代碼: 上海;31
權(quán)利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關(guān)鍵詞: 禽流感 病毒 用于 檢測 預(yù)防 試劑盒 疫苗
【權(quán)利要求書】:

1.一種分離的禽流感病毒,其基因組由SEQ?ID?NO:1、SEQ?ID?NO:2、SEQ?ID?NO:3、SEQ?ID?NO:4、SEQ?ID?NO:5、SEQ?ID?NO:6、SEQ?ID?NO:7和SEQ?ID?NO:8所示的RNA片段組成。

2.如權(quán)利要求1所述的一種分離的禽流感病毒,其保藏號為CGMCC?NO:3117。

3.一種用于檢測權(quán)利要求1或2所述的分離的禽流感病毒的試劑盒,其特征在于含有權(quán)利要求1或2所述的分離的禽流感病毒的RNA抽提液、RT反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液和含有引物的PCR反應(yīng)液,所述的PCR反應(yīng)液中的引物為:

HA基因上游引物P1:5’-CAGGGGAATTTCACAACCAGTCAAA-3’,

下游引物P2:5’-GCCAGGGTGTTTTTGCCAATTATATAC-3’;

M基因上游引物P1:5’-AAGATGAGCCTTCTAACCGAGGTC-3’,

下游引物P2:5’-CGGGGTAGTTTTTTACTCCAGCTCTATG-3’;

NA基因上游引物P1:5’-AGCAGGAGTGAAAATGAATCCA-3’,

下游引物P2:5’-AATTGCGAGAGCTTATATAGGC-3’;

NP基因上游引物P1:5’-ATCATGGCGTCTCAAGGCACCAAA-3’,

下游引物P2:5’-GCCTCTTTAATTGTCATACTCCCCTGC-3’;

NS基因上游引物P1:5’-ACATAATGAACTCCAACACTGTGTC-3’,

下游引物P2:5’-GCAAATAAGCTGAAACGAGAAAGTTC-3’;

PA基因上游引物P1:5’-AAATGGAAGACTTTGTGCGACAATG-3’,

下游引物P2:5’-ACAACTATCTCAGTGCATGTGTGAG-3’;

PB1基因上游引物P1:5’-AGGCAAACCATTTGAATGGATGTCA-3’,

下游引物P2:5’-AATTCACTATTTTTGCCGTCTGAGC-3’;

PB2基因上游引物P1:5’-GCGAAAGCAGGTCAATTATATTCAG-3’,

下游引物P2:5’-AACAATTCGACACTAATTGATGGCC-3’。

4.一種用于預(yù)防權(quán)利要求1或2所述的禽流感病毒的疫苗,其特征在于:含有滅活的權(quán)利要求1或2所述的分離的禽流感病毒。

5.權(quán)利要求4所述的用于預(yù)防禽流感病毒的疫苗的制備方法,其特征在于包括如下步驟:a),一個(gè)疫苗抗原液制備及毒價(jià)測定的步驟,將權(quán)利要求1或2所述的禽流感病毒用滅菌生理鹽水稀釋后,接種非免疫雞胚,收取尿囊液,測定其毒價(jià)在109.6-109.8ELD50,HA價(jià)在1∶256-512之間,病毒液置冰箱中保存?zhèn)溆茫?/p>

b),一個(gè)抗原液滅活的步驟,將福爾馬林溶液加入病毒液中,檢驗(yàn)合格后作為制備抗原液;

c),一個(gè)制備油相佐劑的步驟;

d),一個(gè)制備疫苗水相的步驟;

e),一個(gè)配制疫苗的步驟,將油相與水相預(yù)混后,再將混合物注入到高壓勻漿泵內(nèi)乳化,制成油包水乳劑即為疫苗。

6.如權(quán)利要求5所述的用于預(yù)防禽流感病毒的疫苗的制備方法,其特征在于:所述的油相佐劑由白油、司本-80和硬脂酸鋁配制混合而成。

7.如權(quán)利要求5所述的用于預(yù)防禽流感病毒的疫苗的制備方法,其特征在于:在制備疫苗水相的步驟中,將吐溫-80經(jīng)高溫滅菌后,加入到已滅活抗原液中,吐溫-80的終濃度在2%-5%之間,經(jīng)充分溶解混合即為水相。

8.一種抗體,抗權(quán)利要求1或2所述的一種分離的禽流感病毒。

9.一種分離的禽流感病毒,其基因組由SEQ?ID?NO:9、SEQ?ID?NO:10、SEQ?ID?NO:11、SEQ?ID?NO:12、SEQ?ID?NO:13、SEQ?ID?NO:14、SEQ?ID?NO:15和SEQ?ID?NO:16所示的RNA片段組成。

10.如權(quán)利要求9所述的一種分離的禽流感病毒,其保藏號為CGMCC?NO:3118。

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1、專利原文基于中國國家知識(shí)產(chǎn)權(quán)局專利說明書;

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