技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種新的肺炎球菌結(jié)合疫苗。具體而言，本發(fā)明涉及一種肺炎球 菌多個(gè)血清型莢膜糖與蛋白載體結(jié)合的新的肺炎球菌結(jié)合疫苗，來(lái)源于不同血清 型的莢膜糖通過與蛋白載體的化學(xué)結(jié)合后，以2價(jià)血清型莢膜糖-蛋白結(jié)合體和/ 或多價(jià)血清型莢膜糖-蛋白結(jié)合體形式存在于疫苗中。本發(fā)明還涉及所述的新的肺 炎球菌結(jié)合疫苗的制備方法，以及新的細(xì)菌莢膜糖蛋白結(jié)合疫苗的制備方法。

背景技術(shù)

肺炎鏈球菌(Streptococcus?pneumoniae)引發(fā)的疾病是全球兒童尤其是發(fā)展 中國(guó)家兒童發(fā)病率和死亡率的最主要病因，肺炎球菌的疾病負(fù)擔(dān)主要來(lái)自于2歲 以下兒童和老年人，肺炎球菌疾病已成為全球一個(gè)嚴(yán)重的公共健康問題。全球每 年約1,060萬(wàn)5歲以下兒童罹患肺炎球菌疾病，WHO估計(jì)每年有160萬(wàn)人死于肺 炎球菌疾病，包括70～100萬(wàn)5歲以下的兒童，其中大多數(shù)是生活在發(fā)展中國(guó)家 的兒童(http://www.who.int/biologicals/areas/vaccines/pneumo/en/)。全球通過接種 疫苗可預(yù)防的小于5歲兒童死亡疾病中，肺炎球菌疾病為第1位，占28％(楊永 弘，中國(guó)疫苗和免疫，2008；14：4：376-377)。肺炎球菌疾病死亡人數(shù)已超過艾滋病、瘧 疾和麻疹死亡人數(shù)的總和(Obaro，Expert?Rev?Vaccines.2009；8(8)：1051-1061)。季節(jié) 性流感病毒、H1N1流感病毒、HIV病毒感染和其他與免疫缺陷相關(guān)的病癥使罹患 肺炎球菌病的幾率大增。美國(guó)CDC公布上世紀(jì)每次流感大流行，繼發(fā)的肺炎球菌 疾病是發(fā)病和死亡的最主要病因，在季節(jié)性流感流行期間也觀察到同樣的情況 (http://www.cdc.gov/h1n1flu/vaccination/provider/provider_pneumococcal.htm)。

肺炎球菌誘發(fā)的嚴(yán)重疾病包括肺炎、腦膜炎和敗血癥，中耳炎、鼻竇炎和氣 管炎也為常見，但感染的臨床癥狀略輕。暴露于肺炎球菌后，常出現(xiàn)暫時(shí)性鼻咽 部細(xì)菌定植但并不發(fā)病，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降，肺炎球菌可造成呼吸系統(tǒng)的局部感 染，如急性中耳炎、鼻竇炎等；肺炎球菌進(jìn)入下呼吸道導(dǎo)致肺炎；進(jìn)一步，肺炎 球菌侵入血液、腦脊液或其他原本無(wú)菌的部位時(shí)所形成的感染性疾病，稱為侵襲 性肺炎球菌疾病(Invasive?Pneumococcal?Disease，IPD)，菌血癥性肺炎、菌血癥發(fā) 熱、敗血癥和腦膜炎是IPD的主要臨床表現(xiàn)。

肺炎球菌感染的高發(fā)人群是＜5歲兒童和≥65歲的老人，其中＜2歲兒童發(fā)病 率最高。美國(guó)在大規(guī)模使用肺炎球菌結(jié)合疫苗前，IPD在≤12月齡幼兒中的年發(fā) 病率為167/10萬(wàn)，在6～11月齡幼兒中的發(fā)病率達(dá)到235/10萬(wàn)的高峰，在12～23 月齡幼兒中的發(fā)病率為203/10萬(wàn)，而整體人群的發(fā)病率只有24/10萬(wàn)。在歐洲和 美國(guó)，IPD的年發(fā)病率為10～100例/10萬(wàn)。發(fā)展中國(guó)家中5歲以下兒童中IPD的 發(fā)病率要比工業(yè)化國(guó)家高好幾倍。我國(guó)1996～2000年＜5歲兒童死亡監(jiān)測(cè)結(jié)果分析 中，肺炎是首位原因(773/10萬(wàn))，占全部死亡的19％(楊永弘，中國(guó)疫苗和免 疫，2008；14：4：376-377)。

肺炎球菌是革蘭陽(yáng)性、具有莢膜的雙球菌。莢膜多糖(Polysaccharides，PS) 為其主要致病毒力因子。根據(jù)莢膜多糖的成份差異，將肺炎球菌區(qū)分46個(gè)血清群 91個(gè)血清型。不同年齡、時(shí)間和地理區(qū)域的優(yōu)勢(shì)流行血清型分布譜也有所不同， 但常見的血清型在全球各地都有所發(fā)現(xiàn)，且全球常見的致病血清型是一致的。從 全球范圍來(lái)看，約20余種血清型與超過80％發(fā)生在各年齡段的IPD有關(guān)。全球最 常見的血清群是6、14、19，然而在發(fā)展中國(guó)家幼兒IPD中主要是1、5、8血清群。