技術領域

本發明屬于臨床生物化學酶學檢驗及質量控制領域，特別涉及甜菜堿作為丙氨酸氨基轉 移酶穩定劑的應用及丙氨酸氨基轉移酶校準品組合物。

背景技術

血清丙氨酸氨基轉移酶(Alanine?Aminotransferas，ALT)是臨床生化最常用的肝功能檢測 項目，在肝病防治中起了積極作用。為保證檢測結果的準確性，ALT校準品質控品起著重要 作用，而校準品質控品中ALT酶活性的穩定性就成為重點。但ALT的活性因受時間和貯存溫 度等多種因素的影響會發生明顯變化，尤其在高溫天氣，酶活力每小時下降幾個單位。目前， 國內外比較常用的ALT的穩定劑多為糖醇類如海藻糖等。但這些穩定劑的添加會使檢測系統 產生不同程度的基體效應((matrix?effect)，從而影響檢測結果。甜菜堿(betaine)又名三甲 基甘氨酸，化學名稱為三甲氨基乙內酯，作為一種滲透劑(osmolyte)在自然界中廣泛存在。 Stefan?Knapp等人(Stefan?K，Extremophiles[J]，1999)的研究表明甜菜堿能影響RNaseA 的去折疊熱動力學參數從而穩定蛋白酶的天然折疊狀態，Dominic?Lambert等(Dominic? Lambert，J.Mol.Biol[J]，2007)研究發現甜菜堿等滲透劑能穩定RNA的二級與三級結 構，并穩定RNA-Mg2+的相互作用。本發明提供甜菜堿作為丙氨酸氨基轉移酶穩定劑的應用。

目前，國內各個公司提供的檢測試劑盒從試劑組成、血清和試劑的用量比例、單雙試劑、 檢測程序等都會有所不同，造成病人樣品檢測結果的不一致，給疾病的診斷、治療、療效觀 察、預防、科研等工作帶來了不利的影響。為了使酶測定結果在方法間，實驗室間有可比性， 消除參考范圍的多重混亂，以利于臨床應用，開展酶測定的標準化工作勢在必行。由于校準 品在檢測體系中基體效應的存在，故目前公認病人新鮮血清才是最好的校準品。由于人血清 中ALT酶活性的不穩定，給新鮮血清的運輸和保存形成了極大的不便。本發明另一目的是提 供了一種以甜菜堿為穩定劑的ALT血清校準品組合物。

發明內容

本發明所要解決的技術問題之一是提供一種穩定血清ALT酶活力的穩定劑甜菜堿，即甜 菜堿對谷丙轉氨酶的穩定作用。

本發明所要解決的另一技術問題是提供一種以甜菜堿為穩定劑的ALT血清校準品組合 物，其特征在于所述校準品組合物包括：人血清與甜菜堿，甜菜堿濃度為1mol/L。

甜菜堿對人血清中ALT酶活力有較好的穩定作用，37℃添加甜菜堿的血清可穩定48小時， 25℃添加甜菜堿的血清可穩定4天，這樣的穩定效果可很好滿足在常溫或夏季的高溫下短期 運輸血清的需要；4℃添加甜菜堿的血清可穩定4周、-20℃添加甜菜堿的的血清可穩定4 個月。

血清中的添加劑對各檢測系統會產生不同程度的基體效應(matrix?effect)，但基體效 應有絕對性也有其相對性，只要經方法學比較認可某基體效應可被忽略不計或由基體效應對 某檢測系統引入的誤差在可接受水平即可認為“無”基體效應。在臨床常用的幾個檢測體系 中進行實驗，本發明提供的校準品組合物在檢測體系中無明顯基體效應。

本發明所提供的校準品組合物有很好的穩定效果，尤其是高溫下的短期穩定作用，且其 在常用的檢測系統中未見明顯集體效應，適合用于臨床實驗室ALT檢測的各檢測體系的校準。

具體實施方式

下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用于說明本發明而不 用于限制本發明的范圍。此外應理解，在閱讀了本發明講授的內容之后，本領域技術人員可 以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。

實施例1

穩定實驗