本發明涉及從Gluconobacter?oxydans?DSM?4025中獲得的編碼醛脫氫 酶的新的DNA、含有所述DNA的表達載體和含有所述表達載體的重組微 生物。此外，本發明涉及生產重組醛脫氫酶蛋白質的方法，以及用重組醛 脫氫酶蛋白質或者用含有所述表達載體的重組微生物從L-山梨糖酮來生產 L-抗壞血酸(維生素C)和/或2-酮基-L-古洛糖酸(2-keto-L-gulonic?acid， 2-KGA)的方法。

維生素C是人類必不可少的營養因子之一，通過Reichstein方法，人 們已對其進行了大約60年的商業合成。合成的維生素C還可用于動物飼 料，即使畜牧動物能在體內合成維生素C。雖然所述的Reichstein方法對 維生素C的工業生產來說有許多的優點，但其仍然有一些人們不欲看到的 問題，例如，能量消耗過高以及其中使用了相當大的量的有機溶劑和無機 溶劑。因此，在過去的數十年中，人們已研究了多種通過用酶進行轉化來 制造維生素C的方法，這些方法更為經濟、環保。

本發明涉及經過分離的編碼醛脫氫酶的核酸分子，所述核酸分子包含 與SEQ?ID?NO：1的核苷酸序列至少95％相同的多核苷酸。

本文中使用的“SNDH”表示醛脫氫酶(aldehyde?dehydrogenase)。

本文中使用的“核酸分子”包括DNA和RNA，除非另有指明，其包 括雙鏈核酸分子、單鏈核酸分子以及它們的核苷。其中還包括雜交體，例 如DNA-RNA雜交體、DNA-RNA-蛋白質雜交體、RNA-蛋白質雜交體和 DNA-蛋白質雜交體。

本文中使用的“突變”指在目標核苷酸序列中的單個堿基對的改變、 插入或缺失。

本文中使用的“誘變”表示在DNA中產生突變的方法。“隨機”誘 變后，突變的具體位置是不確定的，其可能發生于微生物染色體上的任何 位置，所述突變是化學處理或輻射等手段所導致的物理損傷的結果。

本文中使用的“啟動子”指一段DNA序列，其通常被描述為基因的 5’區域，處于鄰近起始密碼子的位置。其鄰近基因的轉錄在啟動子區域得 以起始。如果啟動子是可誘導型啟動子，那么所述轉錄的速率能響應誘導 劑而增加。相反，如果啟動子是組成性啟動子的話，那么所述轉錄的速率 則不受誘導劑的調控。

本文中使用的“百分比相同(percent?identical)”指：與作為比較的 核苷酸或氨基酸序列中的相同核苷酸或氨基酸相匹配的核苷酸或氨基酸在 目標核苷酸或氨基酸序列中所占的百分比，所述比較是通過后面例舉的序 列分析程序來進行的。

本發明包括經過分離的編碼醛脫氫酶的核酸分子，所述核酸分子包含 一段多核苷酸，所述多核苷酸與選自由(a)SEQ?ID?NO：1中第258-2084 位核苷酸、(b)SEQ?ID?NO：1中第351-2084位核苷酸、(c)SEQ?ID?NO： 1中第258-1955位核苷酸和(d)SEQ?ID?NO：1中第351-1955位核苷酸所 構成的組的多核苷酸至少95％相同。

在本發明的另一個方面，提供了經過分離的編碼醛脫氫酶的核酸分 子，所述核酸分子包含選自由(a)編碼具有SEQ?ID?NO：2中氨基酸序列 的多肽的多核苷酸、(b)編碼由SEQ?ID?NO：2中第32-609位氨基酸所構 成的多肽的多核苷酸、(c)編碼由SEQ?ID?NO：2中第1-566位氨基酸所 構成的多肽的多核苷酸和(d)編碼由SEQ?ID?NO：2中第32-566位氨基酸 所構成的多肽的多核苷酸所構成的組的多核苷酸。本發明中還包括如下蛋 白質，所述蛋白質具有SNDH活性，并且是通過在上述氨基酸序列中取 代、缺失、插入或增加一個或多個氨基酸從上述蛋白質得到的。

作為本發明的另一個方面，功能衍生物被定義為：在本發明氨基酸序 列的基礎上，通過增加、插入、缺失和/或取代此類序列中的一個或多個氨 基酸殘基而獲得的，其中，此類衍生物仍然具有SNDH活性，這可用本領 域內已知的或本文中特別描述的檢測方法檢測出來。此類功能衍生物可以 通過本領域內已知的化學肽合成方法來制造，或者可以依靠現有技術中已 知的方法在本文公布的DNA序列的基礎上通過重組手段來制得。在蛋白 質和肽中進行的大體上不改變此類分子活性的氨基酸交換在現有技術中是 已知的。