技術領域

本發明涉及磺胺甲噻唑人工抗原及其制備方法與應用。

背景技術

磺胺甲噻唑(Sulfamethylthiazole)，又名甲噻磺胺，是一種人工合成的中效磺胺藥，其性質穩定、抑菌譜廣、毒性小、口服吸收良好且價格低廉，對畜禽疾病控制與治療起重要作用，廣泛應用于畜牧業。但是由于它在體內的作用時間和代謝時間較長，易殘留在動物體內，通過任何途徑攝入都有可能在人體中蓄積。藥物蓄積濃度超過一定值對人體機能是有害的，長期蓄積則會導致磺胺藥抗藥性的產生，造成耐藥菌的流行性感染，從而失去了治療人類疾病的價值，對人類的身體健康產生很大危害。所以，有必要對動物性食品中的磺胺類藥物殘留進行監測。我國以及美國、歐盟等國家規定了動物性食品中總磺胺以及單個磺胺的最高殘留限量(MRLs)為0.1mg/kg。

目前，獸藥殘留檢測常用的方法有氣相色譜、高效液相色譜以及氣質聯用等理化分析方法。雖然這些方法特異性強、靈敏度高，但是樣品前處理操作步驟繁瑣，成本較高，也不適用于大批量樣品的篩選檢測。免疫化學分析由于在抗原抗體的定性定量方面獨特的優勢和操作簡便快速、成本低、靈敏度較高、分析樣本量大的優點彌補了理化分析的不足，在磺胺藥物的殘留檢測中起著越來越重要的作用。

影響免疫化學分析質量的根本因素是抗體的特異性與親和性，這些性質又決定于免疫半抗原分子的結構，因此免疫半抗原的分子設計與合成就是產生特異性抗體和建立小分子獸藥殘留快速檢測技術的最基礎和最關鍵的步驟。

發明內容

本發明的目的是提供一種磺胺甲噻唑人工抗原及其制備方法與應用。

本發明所提供的磺胺甲噻唑人工抗原，是將磺胺甲噻唑半抗原與載體蛋白偶聯獲得的抗原。

磺胺甲噻唑半抗原是一種化合物，其結構為式I所示。

式I

磺胺甲噻唑半抗原也是屬于本發明的保護范圍。

其中，所述的化合物與所述載體蛋白以酰胺鍵偶聯。所述載體蛋白為牛血清白蛋白或卵清蛋白。

所述磺胺甲噻唑半抗原可按如下的方法制備：

在乙醇中將磺胺甲噻唑與對醛基苯甲酸反應，獲得所述化合物。所述磺胺甲噻唑與醛基苯甲酸的物質的量比為1∶(1-3)。

本發明的磺胺甲噻唑半抗原在磺胺甲噻唑苯環的氨基上引入一個對醛基苯甲酸結構，既最大程度保留了磺胺甲噻唑的特征結構，又具有可以與載體蛋白發生活性偶聯的基團-COOH。磺胺甲噻唑半抗原經活性酯法與載體蛋白偶聯可制備磺胺甲噻唑的人工抗原。磺胺甲噻唑的人工抗原在磺胺甲噻唑半抗原與載體蛋白間含有一個對醛基苯甲酸間隔臂，包被原與免疫原結構上的差異可以進一步提高檢測的靈敏度和特異性。用該磺胺甲噻唑人工抗原免疫動物，可獲得特性高的特異性抗體。該磺胺甲噻唑人工抗原與其他已經報道的磺胺甲噻唑人工抗原聯合應用于免疫分析，可提高檢測方法的靈敏度和特異性。本發明的磺胺甲噻唑半抗原和磺胺甲噻唑的人工抗原可用于磺胺藥物的殘留檢測。

附圖說明

圖1為磺胺甲噻唑半抗原質譜圖。

圖2為磺胺甲噻唑人工抗原的紫外光譜圖。

具體實施方式

下述實施例中如無特殊說明所用方法均為常規方法，所用試劑均可從商業途徑獲得。

實施例1、制備磺胺甲噻唑半抗原

1.磺胺甲噻唑半抗原的制備

1)稱取100mg磺胺甲噻唑，置于10mL三角燒瓶中，滴加2mL無水乙醇，充分攪拌使其完全溶解；

2)稱取100mg對醛基苯甲酸，置于10mL三角燒瓶，滴加2mL無水乙醇，充分攪拌使其完全溶解；

3)將磺胺甲噻唑乙醇溶液和對醛基苯甲酸乙醇溶液混合，置于室溫磁力攪拌過夜。過夜之后，離心，棄上清液，獲得淺黃色沉淀，60℃干燥，獲得磺胺甲噻唑半抗原121mg，產率為30％。

2.磺胺甲噻唑半抗原的鑒定

取磺胺甲噻唑半抗原進行ESI質譜鑒定。該物質的ESI分子離子峰為405(M-1)和407(M+1)，見圖1。

元素分析，結果(％，計算值)如下：C，50.36；H，3.73；N，10.36；O，19.73；S，15.82。

磺胺甲噻唑半抗原的結構式如式I所示：

式I

實施例2、制備磺胺甲噻唑人工抗原

1)磺胺甲噻唑人工抗原的制備