方法領域

本發明涉及夏蠟梅雜種Sinocalycanthus?chinensis?X Calycanthus?floridus組培快繁方法，屬于生物技術領域。

背景技術

夏蠟梅雜種Sinocalycanthus?chinensis?X?Calycanthus floridus為江蘇省中國科學所自主培育的園藝花卉新品種，親本夏 蠟梅和美國蠟梅，雜種保持母本花型，繼承父本花色，觀賞價值高于 親本，且耐強光暴曬，適應性好于親本，表現雜種優勢，但同時它又 表現為雜種不育，組培快繁技術正好解決了這一難題。

發明內容

本發明的目的在于提供一種夏蠟梅雜種組培快繁方法，為夏蠟梅 雜種的規模化育苗提供一條有效途徑。

本發明的夏蠟梅雜種組培快繁方法，是通過對夏蠟梅雜種的離體培 養，建立起夏蠟梅雜種的快繁體系，步驟包括材料選擇、清洗、初代 接種、增殖培養、生根培養和煉苗移栽，具體做法：采集夏蠟梅雜種 半木質化新枝為外植體，去除葉片，剪成3-5cm長度，消毒后切成 1cm大小帶節間的莖段，吸干表面水分放入啟動培養基培養，待長出 不定芽后切下，放入增殖培養基培養，苗高2cm時轉入生根培養基培 養，生根后煉苗移栽。其特征在于最佳啟動培養基為 WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂；最佳增殖培養基為 WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂和MS大量元素+WPM 其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂；最佳生根培 養基為3/5MS大量元素+WPM其它成分+0.2mg/L?IBA+1％蔗糖+0.8％瓊 脂+0.05％活性炭；培養條件為培養基pH5.8，溫度26±2℃、光照16h/ 天、光強1600～2000lx。增殖培養過程中交替使用培養基 WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂和MS大量元素+WPM 其它成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂，增殖效果佳； 初代接種的消毒方法用75％酒精浸泡1分鐘，再用0.1％HgCl2滅菌 8min，無菌水清洗3次；

本發明的優越性在于成活率達95％以上，為夏蠟梅雜種的規模 化育苗提供了一條有效途徑。

具體實施方式

1.4-5月上午采集夏蠟梅雜種新枝，去除葉片，自來水清洗備用。

2.將清洗干凈的外植體材料置于超凈工作臺上，剪成3-5cm，放在三 角瓶內，用用75％酒精浸泡1-2分鐘，再用0.1％HgCl2滅菌8-10min， 無菌水清洗2-4次，切成1cm大小帶節間的莖段，無菌濾紙吸干表面 水分，放入啟動培養基WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％ 瓊脂pH5.8上培養，溫度26±2℃、光照16h/天以及光強1600～ 2000lx。

3.待長出不定芽后，切下，放入增殖培養基MS大量元素+WPM其它 成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂pH5.8增殖，溫度 26±2℃、光照16h/天以及光強1600～2000lx。

4.將增殖培養基中2cm以上的有效苗轉入生根培養基培養3/5MS大 量元素+WPM其它成分+0.2mg/L?IBA+1％蔗糖+0.8％瓊脂pH5.8培養，溫 度26±2℃、光照16h/天以及光強1600～2000lx。

5.根長1-2cm并有2條以上側根時煉苗2-3天移栽。

實施例1

1.2007年4月25日上午采集夏蠟梅雜種新枝，去除葉片，自來水清 洗備用。

2.將清洗干凈的外植體材料置于超凈工作臺上，剪成3-5cm，放在三 角瓶內，用用75％酒精浸泡1分鐘，再用0.1％HgCl2滅菌8min，無 菌水清洗3次，切成1cm大小帶節間的莖段，無菌濾紙吸干表面水分， 放入啟動培養基WPM+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂 pH5.8上培養，溫度26±2℃、光照16h/天、光強1600～2000lx。

3.15d后長出不定芽，切下，放入增殖培養基MS大量元素+WPM其它 成分+2.0mg/LZT+0.05mg/L?IBA+2％蔗糖+0.8％瓊脂pH5.8增殖，溫度 26±2℃、光照16h/天、光強1600～2000lx。