[發明專利]制備重組人凝血酶的方法無效
| 申請號: | 200780014337.6 | 申請日: | 2007-03-06 |
| 公開(公告)號: | CN101501216A | 公開(公告)日: | 2009-08-05 |
| 發明(設計)人: | K·奧斯瑟 | 申請(專利權)人: | 胡瑪基因公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 | 代理人: | 羅菊華 |
| 地址: | 美國亞*** | 國省代碼: | 美國;US |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 制備 重組 凝血酶 方法 | ||
1.一種制備含有如SEQ?ID?NO:16所示的gla結構域的重組人 凝血酶原的方法,其包括在無血清條件下培養重組人宿主細胞,其中 所述的重組人宿主細胞含有編碼所述重組人凝血酶原的表達載體,SEQ? ID?NO:16是Ala?Asn?Thr?Phe?Leu?Xaa?Xaa?Val?Arg?Lys?Gly?Asn?Leu? Xaa?Arg?Xaa?Cys?Val?Xaa?Xaa?Thr?Cys?Ser?Tyr?Xaa?Xaa?Ala?Phe?Xaa? Ala?Leu?Xaa?Ser?Ser?Thr?Ala?Thr?Asp?Val,其中Xaa是谷氨酸或γ- 羧基谷氨酸。
2.根據權利要求1的方法,其中所述人宿主細胞是人胚腎(HEK) 細胞或PER-C6細胞。
3.根據權利要求2的方法,其中所述HEK細胞選自:HEK?293、 HEK?293T、HEK?293S和HEK?293?EBNA。
4.根據權利要求1-3中任一項的方法,其中隨后通過使用ecarin 將所述重組人凝血酶原活化為重組人凝血酶。
5.根據權利要求4的方法,其中所述重組人凝血酶比天然人凝血 酶更有效地凝固纖維蛋白原。
6.根據權利要求1-3中任一項的方法,其中所述人重組凝血酶 原如SEQ?ID?NO:2或SEQ?ID?NO:4所示。
7.包含載體的分離的重組人宿主細胞,其中所述載體包含編碼含 有如SEQ?ID?NO:16所示的gla結構域的人凝血酶原的多核苷酸。
8.根據權利要求7的分離的重組人宿主細胞,其是如權利要求2 或3所定義的HEK細胞。
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