本申請是中國申請00809834.4的分案申請，該母案于2000年5月4日以國際申請?zhí)朠CT/US00/40018提交，于2001年12月30日進(jìn)入中國國家階段，本分案采用了與該母案一致的發(fā)明名稱。

發(fā)明領(lǐng)域

本發(fā)明涉及使用與B細(xì)胞表面標(biāo)志，如CD19或CD20結(jié)合的拮抗劑治療自身免疫病。

發(fā)明背景

淋巴細(xì)胞是骨髓造血過程中產(chǎn)生的多種白細(xì)胞的一種。存在兩種重要的淋巴細(xì)胞群：B淋巴細(xì)胞(B細(xì)胞)和T淋巴細(xì)胞(T細(xì)胞)。這里對淋巴細(xì)胞中的B細(xì)胞尤其有興趣。

B細(xì)胞在骨髓中成熟，離開骨髓時(shí)在其細(xì)胞表面表達(dá)與抗原結(jié)合的抗體。當(dāng)天然B細(xì)胞首次與其膜結(jié)合抗體特異的抗原相遇時(shí)，細(xì)胞開始迅速分裂，其子代分化成記憶B細(xì)胞和稱為“漿細(xì)胞”的效應(yīng)細(xì)胞。記憶B細(xì)胞壽命很長，并繼續(xù)表達(dá)與其親代細(xì)胞具有相同特異性的膜結(jié)合抗體。漿細(xì)胞不產(chǎn)生膜結(jié)合抗體，而代之產(chǎn)生可分泌型的抗體，可分泌的抗體是體液免疫的重要效應(yīng)分子。

CD20抗原(也稱為人B淋巴細(xì)胞限制性分化抗原Bp35)是前B細(xì)胞和成熟B淋巴細(xì)胞上的疏水性跨膜蛋白，分子量大約35kD(Valentine等生物學(xué)化學(xué)雜志264(19)：11282-11287(1989)；和Einfeld等，歐洲分子生物學(xué)組織雜志7(3)：711-717(1988))。該抗原也在大于90％的B細(xì)胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)上表達(dá)(Anderson等，血液63(6)：1424-1433(1984))，但在造血干細(xì)胞，原B細(xì)胞，正常漿細(xì)胞或其它正常組織中未發(fā)現(xiàn)(Tedder等，免疫學(xué)雜志135(2)：973-979，1985)。CD20在細(xì)胞周期啟動(dòng)和分化的活化過程早期階段起調(diào)節(jié)作用(Tedder等，同上)，并可能發(fā)揮鈣離子通道的功能。(Tedder等，細(xì)胞生物學(xué)雜志14D：195(1990))

由于CD20在B細(xì)胞淋巴瘤中表達(dá)，這一抗原可作為用于“靶向”這類淋巴瘤的候選者。實(shí)質(zhì)上，這種靶向可如下歸納：給予患者B細(xì)胞表面抗原CD20的特異性抗體。這些抗CD20抗體與正常和惡性B細(xì)胞(表面的)CD20抗原特異結(jié)合；與表面抗原CD20結(jié)合的抗體可引起腫瘤性B細(xì)胞的破壞和耗竭。此外，具有破壞腫瘤潛力的化學(xué)制劑或放射活性標(biāo)記能與抗CD20抗體偶聯(lián)，從而將所述制劑特異性“運(yùn)送”至腫瘤性B細(xì)胞。不管用什么方法，一個(gè)主要目的是破壞腫瘤；可根據(jù)所使用的具體抗CD20抗體確定具體方法，因此，靶向CD20抗原的現(xiàn)有方法很多。

CD19是B細(xì)胞系細(xì)胞表面表達(dá)的另一種抗原。象CD20一樣，發(fā)現(xiàn)CD19在從干細(xì)胞階段到快要最終分化為漿細(xì)胞之前的整個(gè)分化過程中均位于細(xì)胞上(Nadler，L.淋巴細(xì)胞分型II2：3-37和Appendix，Renling等，編(1986)Spring?Verlag出版)。然而與CD20不同，與CD19結(jié)合的抗體引起CD19抗原的內(nèi)在化。在多種抗體中使用HD237-CD19抗體(也稱為B4抗體)可鑒定CD19抗原(Kiesel等，白血病研究II，12：1119(1987))。CD19抗原存在于4-8％的外周血單個(gè)核細(xì)胞及大于90％的分離自外周血，脾臟，淋巴結(jié)或扁桃體的B細(xì)胞。在外周血T細(xì)胞，單核細(xì)胞或粒細(xì)胞中未檢出CD19。實(shí)際上，所有的非T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病(ALL)，B細(xì)胞慢性淋巴細(xì)胞白血病(CLL)和B細(xì)胞淋巴瘤均表達(dá)可被B4抗體檢測的CD19(Nadler等，免疫學(xué)雜志131：244(1983)；和Nadler等，血液學(xué)進(jìn)展，Vol.XIIpp.187-206.Brown，E.編(1981)Grune&Stratton公司出版)。

由B細(xì)胞系的細(xì)胞所表達(dá)的能識別分化階段特異性抗原的其它抗體已得到鑒定。其中有抗CD21抗原的B2抗體；抗CD22抗原的B3抗體；抗CD10抗原的J5抗體(也稱為CALLA)。見1997年1月21日授權(quán)的美國專利5,595,721號(Kaminski等)。