[發(fā)明專利]用于表達抗體的真菌突變體的用途有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200680038777.0 | 申請日: | 2006-10-17 |
| 公開(公告)號: | CN101292024A | 公開(公告)日: | 2008-10-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 莫根斯·T·漢森;克里斯琴·I·喬根森;簡·萊姆貝克 | 申請(專利權(quán))人: | 諾維信公司 |
| 主分類號: | C12N1/15 | 分類號: | C12N1/15;C12N9/58;C12N9/62;C12N15/13 |
| 代理公司: | 北京市柳沈律師事務(wù)所 | 代理人: | 封新琴;巫肖南 |
| 地址: | 丹麥*** | 國省代碼: | 丹麥;DK |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 用于 表達 抗體 真菌 突變體 用途 | ||
1.米曲霉細胞,其中內(nèi)源堿性蛋白酶活性、內(nèi)源中性金屬蛋白酶活性和 枯草桿菌蛋白酶類的內(nèi)源絲氨酸蛋白酶活性降低多于50%,其中所述活性降 低是將分別負責(zé)產(chǎn)生蛋白酶活性的基因序列失活或者部分或全部消除的結(jié) 果,或者是反義技術(shù)的結(jié)果,其中所述的堿性蛋白酶、中性金屬蛋白酶和枯 草桿菌蛋白酶類的絲氨酸蛋白酶由選自下組的核苷酸序列編碼:
(a)編碼堿性蛋白酶的核苷酸序列,所述堿性蛋白酶為氨基酸序列SEQ? ID?NO:30;編碼中性金屬蛋白酶的核苷酸序列,所述中性金屬蛋白酶為氨基 酸序列SEQ?ID?NO:31,和編碼枯草桿菌蛋白酶類的絲氨酸蛋白酶的核苷酸序 列,所述枯草桿菌蛋白酶類的絲氨酸蛋白酶為氨基酸序列SEQ?ID?NO:32;或
(b)SEQ?ID?NO:26的核苷酸序列,SEQ?ID?NO:27的核苷酸序列,和SEQ? ID?NO:28的核苷酸序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的米曲霉細胞,其中堿性蛋白酶由alp基因編碼,中 性金屬蛋白酶由npI基因編碼,枯草桿菌蛋白酶類的絲氨酸蛋白酶由pepC基 因編碼。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的米曲霉細胞,其中kexin亞族的內(nèi)源的鈣依賴 性中性絲氨酸蛋白酶活性全部或部分失活,其中所述鈣依賴性中性絲氨酸蛋 白酶由選自下組的核苷酸序列編碼:
(a)編碼kexin亞族的鈣依賴中性絲氨酸蛋白酶活性的核苷酸序列,其中 所述kexin亞族的鈣依賴中性絲氨酸蛋白酶為氨基酸序列SEQ?ID?NO:33;或
(b)為SEQ?ID?NO:29的序列的核苷酸序列。
4.在根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項的米曲霉宿主細胞中產(chǎn)生異源多肽的方 法,其包括
(a)將編碼異源多肽的核酸序列引入宿主細胞;
(b)在有益于表達所述異源多肽的條件下,在合適的生長培養(yǎng)基中培養(yǎng)來 自(a)的細胞;和
(c)分離蛋白質(zhì)產(chǎn)物。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法,其中所述異源多肽是哺乳動物多肽。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法,其中所述多肽是抗體或抗體片段。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法,其中抗體或抗體片段選自下組:IgG1、IgG2、 IgG3、IgG4、IgM、IgA、IgD、IgE、F(ab’)2和Fab。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法,其中抗體是IgG1。
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