技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及新蛇菊苷A的含有比例比蛇菊苷高的屬于甜菊品種的植物體、由該植物體和/或其干燥葉中提取的甜味劑的制備方法。

本發(fā)明進(jìn)一步涉及由該甜味劑制備高純度新蛇菊苷A的方法。

背景技術(shù)

甜菊是原產(chǎn)地為南美巴拉圭的菊科多年生植物，學(xué)名甜菊(Steviarebaudiana?Bertoni)。甜菊含有具砂糖的300倍以上的甜味的甜味成分，因此，為提取該甜味成分作為天然甜味劑使用而對(duì)其進(jìn)行栽培。

甜菊的甜味成分已知有蛇菊苷(C₃₈H₆₀O₁₈)、新蛇菊苷A(C₄₄H₇₀O₂₃)、新蛇菊苷C、D、E、杜爾可苷A(dulcoside?A)等。通常栽培的甜菊品種中，上述甜味成分中的蛇菊苷(ST)為主要成分，新蛇菊苷A(RA)的含量為蛇菊苷的10分之3～4左右，新蛇菊苷C的含量比這還少，但根據(jù)品種的不同，也有以新蛇菊苷C為主要成分的各種品種。

在澀味、辣味等用舌頭感知的味道中，甜味的性質(zhì)非常微妙。蛇菊苷具有砂糖300倍的甜度，因此在食品工業(yè)界中作為天然甜味劑使用。其甜味與砂糖較類(lèi)似，但是后味殘留有苦味等令人不快的味道。因此，作為甜味劑，并不優(yōu)選大量含有蛇菊苷。與此相對(duì)，新蛇菊苷A具有良好的甜味性質(zhì)以及甜度為蛇菊苷的1.3倍～1.5倍。

需要進(jìn)一步開(kāi)發(fā)降低新蛇菊苷A的生產(chǎn)成本、保持穩(wěn)定的干燥葉的收獲量、高含量含有甜味性質(zhì)優(yōu)異的新蛇菊苷A作為甜味劑原料的甜菊品種，同時(shí)保持它們的延續(xù)，以其為基礎(chǔ)制造優(yōu)異的甜味劑。

本發(fā)明人等對(duì)由以往的品種反復(fù)雜交篩選，進(jìn)行品種改良，得到了與蛇菊苷(ST)相比，新蛇菊苷A(RA)顯示高含有比例的甜菊品種，從這些植物中提取甜味成分，制備了新蛇菊苷A的含有比例比蛇菊苷高的優(yōu)異的甜味劑(參照后述專(zhuān)利文獻(xiàn)1-1至1-3)，但是，人們希望更進(jìn)一步開(kāi)發(fā)新蛇菊苷A更為穩(wěn)定的含有比例更高的優(yōu)異的品種。

另一方面，在甜菊植物的品種改良中，確定甜菊植物的方法也有問(wèn)題。作為改良的甜菊植物的識(shí)別方法，可以根據(jù)植株高度、葉片形狀等進(jìn)行識(shí)別，但是甜菊有自交不親合性，容易形成雜種，不可能只通過(guò)植株高度、葉片形狀等進(jìn)行識(shí)別。

另外，也可通過(guò)甜菊對(duì)特有的病原菌的抗病性來(lái)比較確定，但是在甜菊中特有地表現(xiàn)的葉枯病、黑斑病起因于殼針孢、鏈格孢，這些菌是在土壤中生活的菌，如果僅憑這些癥狀來(lái)確定品種，由于不僅是日本，而是世界性發(fā)生，因此只憑這些特性確定品種是不夠的。

對(duì)于甜味成分的含量高、新蛇菊苷A的含有比例比蛇菊苷高的改良品種也可以采用通過(guò)其含有比例進(jìn)行確定的方法，但是由于生長(zhǎng)期間的氣象條件、收獲時(shí)期等的原因，甜味成分的比例不可避免地發(fā)生變化，因此該方法也缺乏現(xiàn)實(shí)性。

最近，還有人開(kāi)發(fā)了使用引物混合物(primer?mix)的RAPD法、通過(guò)DNA鑒定進(jìn)行識(shí)別的方法(參照后述專(zhuān)利文獻(xiàn)2)，但是是否可適用于本發(fā)明的植物體的鑒定尚未明確。

專(zhuān)利文獻(xiàn)1：日本特開(kāi)昭59-045848號(hào)公報(bào)

專(zhuān)利文獻(xiàn)2：日本特開(kāi)昭60-160823號(hào)公報(bào)

專(zhuān)利文獻(xiàn)3：日本特開(kāi)昭61-202667號(hào)公報(bào)

專(zhuān)利文獻(xiàn)4：日本特開(kāi)2003-9878號(hào)公報(bào)

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明所要解決的課題

本發(fā)明的目的在于：培育甜味成分含量和甜味成分含有比優(yōu)異的品種，并為了保持其特征而通過(guò)RAPD法進(jìn)行基因識(shí)別、使其與其它系統(tǒng)、其它品種的甜菊植物區(qū)別，由此提供甜味性質(zhì)優(yōu)異的甜味劑及其制備方法。

解決課題的方法

本發(fā)明的第一方面是相對(duì)于1重量份蛇菊苷含有4重量份以上新蛇菊苷A的甜菊品種。如后所述，重復(fù)進(jìn)行雜交篩選，培育了相對(duì)于1重量份蛇菊苷至少含有4重量份以上新蛇菊苷A的屬于甜菊品種的新型植物體。

本發(fā)明的第二方面是相對(duì)于1重量份蛇菊苷含有4重量份以上新蛇菊苷A的甜味劑的制備方法，其特征在于：將上述植物體或其干燥葉用水或含水溶劑進(jìn)行提取。

本發(fā)明的第三方面是高純度甜味劑的制備方法，所述高純度甜味劑是相對(duì)于1重量份蛇菊苷含有40重量份以上新蛇菊苷A，所述制備方法是將上述所得的甜味劑進(jìn)行重結(jié)晶，制備相對(duì)于1重量份蛇菊苷含有40重量份以上新蛇菊苷A、且它們的含量為92％以上的甜味劑。