1.一種利用生物合成技術(shù)制備莽草酸的方法，主要包括以下步驟：

(1)利用基因工程技術(shù)構(gòu)建莽草酸代謝途徑限速酶的PtacaroFaroBaroEkan多基因盒；

(2)利用Red重組系統(tǒng)敲除細(xì)菌中的莽草酸激酶同工酶aroK和aroL；

(3)敲除細(xì)菌中的shiA基因，并敲入PtacaroFaroBaroEkan多基因盒；

(4)利用基因工程技術(shù)發(fā)酵該重組工程菌獲得莽草酸；

(5)分離、純化莽草酸。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中PtacaroFaroBaroEkan多基因盒的構(gòu)建方法包括如下步驟：

(1)PCR擴(kuò)增基因aroF、aroB、aroE、Ptac、shiA、kan；

(2)分別構(gòu)建重組質(zhì)粒pUC-aroF，pUC-shiA，pET22b-aroB，pET22b-aroE，pET22b-kan；

(3)構(gòu)建PtacaroFaroBaroEkan多基因盒：將三個(gè)基因aroF、aroB、aroE通過(guò)酶切順序連接，在三個(gè)基因前加入Ptac?I強(qiáng)啟動(dòng)子，三個(gè)基因后加入kan抗性基因。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中細(xì)菌為大腸桿菌或枯草桿菌。

4.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中利用Red重組系統(tǒng)敲除aroK和aroL，構(gòu)建aroK、aroL缺失的工程菌株，步驟如下：1.用于同源重組的引物：5’端為aroK基因兩側(cè)的同源臂，3’端為用于擴(kuò)增氯霉素抗性基因的引物，同理設(shè)計(jì)aroL氯霉素抗性基因引物；PCR擴(kuò)增帶FRT位點(diǎn)的氯霉素抗性基因；2.將以上的線性片段轉(zhuǎn)入表達(dá)Red重組酶的菌株中；3.選擇氯霉素抗性轉(zhuǎn)化體；4.FLP重組酶消除氯霉素抗性基因。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中敲入PtacaroFaroBaroEkan多基因盒采用脈沖電轉(zhuǎn)化多基因盒線性片段方法。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述方法，其中分離純化莽草酸采用離子交換色譜法及重結(jié)晶法。

7.權(quán)利要求1所述方法中的重組工程菌，其特征在于該工程菌敲除了aroK和aroL基因和shiA基因，包含由強(qiáng)啟動(dòng)子Ptac、莽草酸合成途徑的限速酶aroF、aroB、aroE及抗性基因kan組成的PtacaroFaroBaroEkan多基因盒。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述重組工程菌，其特征在于該工程菌為大腸桿菌或枯草桿菌。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述重組工程菌，其特征在于該工程菌為大腸桿菌。